培養(yǎng)箱內(nèi)細(xì)胞定時(shí)連續(xù)熒光成像的數(shù)據(jù)分析與可視化觀察,對(duì)于研究細(xì)胞的動(dòng)態(tài)行為和生理過(guò)程至關(guān)重要。以下是相關(guān)介紹:
數(shù)據(jù)分析
細(xì)胞生長(zhǎng)與增殖分析:可以基于明場(chǎng)或熒光圖像自動(dòng)計(jì)算細(xì)胞融合度并生成生長(zhǎng)曲線,還能自動(dòng)計(jì)算熒光通道每孔的平均熒光強(qiáng)度,以此了解細(xì)胞的增殖情況。如 JuLI™ Stage 的標(biāo)配軟件就能根據(jù)測(cè)得的細(xì)胞融合度自動(dòng)生成曲線,量化細(xì)胞遷移率,更加準(zhǔn)確地顯示細(xì)胞遷移率的變化。
熒光細(xì)胞計(jì)數(shù):使用細(xì)胞計(jì)數(shù)模塊,對(duì)熒光染色細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),可通過(guò)改變熒光強(qiáng)度及其他參數(shù)來(lái)優(yōu)化結(jié)果,從而確定細(xì)胞數(shù)量的變化。
熒光強(qiáng)度分析:通過(guò)分析熒光強(qiáng)度水平,量化 GFP、RFP 和 DAPI 通道中圖像的平均熒光強(qiáng)度,了解熒光標(biāo)記的分子或結(jié)構(gòu)的表達(dá)水平和變化趨勢(shì)。
細(xì)胞行為追蹤:結(jié)合時(shí)間序列熒光圖像,通過(guò)軟件量化細(xì)胞相互作用的關(guān)鍵參數(shù),如接觸頻率、接觸時(shí)長(zhǎng)、距離變化等,還可分析細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)軌跡,了解細(xì)胞的遷移速度、方向改變等行為。
共定位分析:同時(shí)采集明場(chǎng)和多個(gè)熒光通道圖像,通過(guò)軟件疊加分析細(xì)胞間的空間關(guān)系,計(jì)算兩種熒光信號(hào)的重疊程度,即共定位系數(shù),以確定不同分子或結(jié)構(gòu)在細(xì)胞內(nèi)的共定位情況。
可視化觀察
延時(shí)攝影視頻制作:使用相關(guān)軟件,如 JuLI™ Stage 標(biāo)配的 EDIT 軟件,可以創(chuàng)建各種類型的延時(shí)攝影視頻,包括單個(gè)視頻編輯、視頻拼接和視頻矩陣,將細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化過(guò)程以視頻的形式直觀地展示出來(lái),可還原到任何想要觀察的時(shí)間點(diǎn),實(shí)現(xiàn)隨時(shí)、連續(xù)地觀察細(xì)胞形態(tài)變化、生長(zhǎng)狀態(tài)和運(yùn)動(dòng)過(guò)程。
圖像編輯與處理:可以對(duì)單個(gè)圖像或所有圖像的亮度和對(duì)比度等設(shè)置進(jìn)行編輯,優(yōu)化圖像質(zhì)量,以便更好地觀察細(xì)胞結(jié)構(gòu)和熒光信號(hào)。
數(shù)據(jù)可視化呈現(xiàn):通過(guò)繪制圖表,如生長(zhǎng)曲線、熒光強(qiáng)度曲線等,將數(shù)據(jù)分析的結(jié)果以直觀的圖表形式呈現(xiàn),便于直觀地比較和分析不同條件下細(xì)胞的變化趨勢(shì)。
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